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細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)

細(xì)胞復(fù)蘇注意事項(xiàng)?復(fù)蘇時(shí)動(dòng)作要快，盡量減少胞內(nèi)形成冰晶，影響復(fù)蘇后細(xì)胞活率。?融化時(shí)盡量不要碰到管口，以免容易造成污染。?若一次性需要復(fù)蘇細(xì)胞很多，可以分批水浴解凍，防止傳熱不佳使得細(xì)胞融化時(shí)間延長(zhǎng)。?若需要同時(shí)復(fù)蘇好幾種細(xì)胞，提前在離心管和培養(yǎng)瓶上做好標(biāo)記，或記住自己擺放的位置，不要弄混亂。4、何判定細(xì)胞是否發(fā)生支原體污染：可以選用直接培養(yǎng)法、熒光染色或PCR方法檢測(cè)，比較常用的是PCR。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生支原體污染時(shí)，原則上是能夠去除支原體的，但是整個(gè)過程耗時(shí)耗力，還要考驗(yàn)個(gè)人操...

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腎小球分離、移植培養(yǎng)

腎小球分離、移植培養(yǎng)SD大鼠頸椎脫臼法處死，75%乙醇浸泡1～2分鐘，2次，置超凈臺(tái)內(nèi)，打開腹腔取出腎臟剪碎，置含Hank's液的無菌培養(yǎng)皿洗滌，置80目不銹鋼篩網(wǎng)上。用扁平自制小鏟輕輕碾磨產(chǎn)物微小組織透過篩網(wǎng)，濾過組織Hank's液混合物用吸管吸至120目不銹鋼篩網(wǎng)，濾過，去小組織塊，濾過物吸至200目不銹鋼篩網(wǎng)，輕輕濾過，Hank's液洗滌次，收集網(wǎng)上腎小球，鏡下觀察為分離良好的腎小球。腎小球用0.2%胰酶、0.1%膠原酶，37℃消化20分鐘，加血清終止胰酶反應(yīng)，離心除去...

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剛拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？

一般在拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？收到細(xì)胞后先不要開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議對(duì)收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況一般可以再申請(qǐng)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培...

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簡(jiǎn)單好用以及精確的細(xì)胞培養(yǎng)的原理和步驟

簡(jiǎn)單好用以及精確的細(xì)胞培養(yǎng)的原理和步驟今天我們要講解的是，細(xì)胞培養(yǎng)的原理和步驟，簡(jiǎn)單好用以及精確，學(xué)完之后，相信你對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)將不再陌生。接下來就開始今天的學(xué)習(xí)吧！細(xì)胞培養(yǎng):體外模擬體內(nèi)需要的生長(zhǎng)條件（溫度，營(yíng)養(yǎng)等），然后加上一些處理?xiàng)l件，比如做藥物篩選，就可以做抗性基因的表達(dá)的篩選，比如還可以測(cè)定某個(gè)基因敲低或是過表達(dá)的產(chǎn)物，這個(gè)當(dāng)然要結(jié)合WB來看最后基因的表達(dá)產(chǎn)物是否升高哦，細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用還有很多。細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理：細(xì)胞傳代（生存空間和營(yíng)養(yǎng)不足，長(zhǎng)得太密，代謝廢物太多，要...

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細(xì)胞培養(yǎng)常見問題匯總

細(xì)胞培養(yǎng)常見問題匯總新買或惠贈(zèng)的細(xì)胞1.新買的或惠贈(zèng)的細(xì)胞如何處理？不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手應(yīng)趕緊做這幾件事：檢測(cè)瓶子是否破裂；培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁；是否有支原體污染；迅速擴(kuò)增凍存。2.能否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活。3.購(gòu)買的細(xì)胞死亡或存活率不佳可能原因？常見原因可能有：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品...

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胎牛血清的作用

胎牛血清的作用胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基，因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過母乳，所以IgG含量低，且含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。01提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。02提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。03有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。04是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料...

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透析胎牛血清具體適用于實(shí)驗(yàn)中有哪些常見場(chǎng)景？

那么，透析胎牛血清具體適用于實(shí)驗(yàn)中有哪些常見場(chǎng)景？我們來詳細(xì)講講。一、實(shí)驗(yàn)過程中需要標(biāo)記氨基酸使用放射性標(biāo)記小分子，對(duì)生物合成過程進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以研究蛋白質(zhì)等大分子的生化性質(zhì)、合成、加工、細(xì)胞內(nèi)傳送、分泌和降解過程。這時(shí)，常將細(xì)胞放在含有充足養(yǎng)分和放射性標(biāo)記氨基酸（如35S標(biāo)記的蛋氨酸或半胱氨酸）的培養(yǎng)液中進(jìn)行標(biāo)記。為避免外源未標(biāo)記的氨基酸的干擾，這時(shí)所用的血清就是透析胎牛血清，不含蛋氨酸和半胱氨酸，基礎(chǔ)培養(yǎng)基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。這種方法常見于生化代謝調(diào)控與疾病的機(jī)理研究...

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無外泌體胎牛血清（Exo-FBS）

無外泌體胎牛血清（Exo-FBS）英文名稱：ExosomedepletedFetalBovineSerum品牌：winsera貨號(hào)：規(guī)格：50mL/瓶貯存：-20℃說明：該產(chǎn)品僅供科研使用胎牛血清（FetalBovineSerum,FBS）是大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)重要的生長(zhǎng)支持物。天然來源的FBS會(huì)含有大量的外泌體（exosome）等囊泡（ExtracellularVesicles）成分。由于FBS來源的外泌體會(huì)對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生巨大干擾，因此，外泌體研究時(shí)必須使用去除外泌體后的FBS進(jìn)...

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